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产品规格：T25培养瓶x1；1.5ml冻存管x2
细胞数量：1x10^6；1x10^6
保存温度：37℃；-198℃
运输方式：常温保温运输；干冰运输
安全等级：1
用途限制：仅供科研1类
培养体系：DMEM高糖培养基+10%FBS+1%双抗
培养温度：37℃
二氧化碳浓度：5%
简介：人成骨细胞系hFOB1.19在0.6mg/ml新霉素G418存在下，用温度敏感的表达载体pUCSVisA58转染自然流产的胎儿四肢组织，建立了此细胞系。在许可温度33.5oC下细胞分裂很快，而在限制温度39.5oC下细胞极少分裂或不分裂。这些细胞具有分化为表达造骨细胞表型的成熟造骨细胞的能力。这些细胞提供了一个同质化的快速增殖模型系统，用于研究正常人造骨细胞的分化，造骨细胞生理和**，生长因子，和对造骨细胞的功能及分化有影响的细胞因子。该细胞引种自ATCCCRL-11372
注释
Group:Space-flowncellline(cellonaut).
Doublingtime:36hours,atpermissivetemperatureof33.5Celsius(ATCC).
Transfectedwith:UniProtKB;P00552;TransposonTn5neo.
Transformant:NCBI_TaxID;1891767;Simianvirus40(SV40)[tsA58].
Anecdotal:HavebeenflowninspaceonshuttleflightSTS-80tostudygrowthinmicrogravity(PubMed=10719274).
STR信息
AmelogeninX
CSF1PO10,13
D2S133823,24
D3S135817,18
D5S81811,12
D6S104313,16
D7S8208,10
D8S117910,14
D12S39120,23
D13S31711,12
D16S5399,13
D18S5110,17
D19S43313,15
D21S1129,32.2
FGA19,22
PentaE8,11
TH017,9.3
TPOX11
vWA16,18
参考文献
Patent=US5693511
HarrisS.A.,SpelsbergT.C.
Immortalizedhumanfetalosteoblasticcells.
PatentnumberUS5693511,02-Dec-1997
PubMed=10719274;DOI=10.1016/S8756-3282(00)00234-9
HarrisS.A.,ZhangM.,KidderL.S.,EvansG.L.,SpelsbergT.C.,TurnerR.T.
Effectsoforbitalspaceflightonhumanosteoblasticcellphysiologyandgeneexpression.
Bone26:325-331(2000)
PubMed=12210717;DOI=10.1002/jcb.10259
SubramaniamM.,JalalS.M.,RickardD.J.,HarrisS.A.,BolanderM.E.,SpelsbergT.C.
FurthercharacterizationofhumanfetalosteoblastichFOB1.19andhFOB/ERalphacells:boneformationinvivoandkaryotypeanalysisusingmulticolorfluorescentinsituhybridization.
J.Cell.Biochem.87:9-15(2002)
验收细胞注意事项
1、收到人成骨细胞系hFOB1.19细胞，请查看瓶子是否有破裂，培养基是否漏出，是否浑浊，如有请尽快联系。
2、收到人成骨细胞系hFOB1.19细胞，如包装完好，请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题，细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来，显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况，出现此状态时，请不要打开细胞培养瓶，应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止3-5小时左右，让细胞先稳定下，再于显微镜下观察，此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁，请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。
3、收到人成骨细胞系hFOB1.19细胞后，请镜下观察细胞，用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多，请离心收集细胞，接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液，使用新鲜配制的培养基，使用进口胎牛血清。刚接到细胞，若细胞不多时血清浓度可以加到15％去培养。若细胞迏到80%左右，血清浓度还是在10％。
4、收到人成骨细胞系hFOB1.19细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养基吸出，留下5-10ML培养基继续培养：超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液，1000转/分钟离心3分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
5、将培养瓶置于37℃培养箱中培养，盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里，存放于4℃冰箱，以备不时之需。
6、24小时后，细胞形态已恢复并贴满瓶壁，即可传代。（贴壁细胞）将培养瓶里的培养基倒去，加3-5ml（以能覆盖细胞生长面为准）PBS或Hanks’液洗涤后弃去。加0.5-1ml0.25%含EDTA的胰酶消化，消化时间以具体细胞为准，一般1-3分钟，不超过5分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁，见细胞脱落下来，加入3-5ml培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后将溶液吸入离心管内离心，1000rpm/5min。弃上清，视细胞数量决定分瓶数，一般一传二，如细胞量多可一传三，有些细胞不易传得过稀，有些生长较快的细胞则可以多传几瓶，以具体细胞和经验为准。（悬浮细胞）用移液管轻轻吹打瓶壁，直接将溶液吸入离心管离心即可。
7、贴壁细胞，悬浮细胞。严格无菌操作。换液时，换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液，37℃，5%CO2培养。